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島津?qū)W堂：一文讀懂阿膠定量“新標(biāo)準(zhǔn)”

2020-04-08 14:10:37來(lái)源：島津關(guān)鍵詞：島津閱讀量：2504

　　【儀器網(wǎng) 島津】導(dǎo)語(yǔ)：古語(yǔ)云“阿膠一碗，芝麻一盞，白米紅餡蜜餞。粉腮似羞，杏花春雨帶笑看。潤(rùn)了青春，保了天年，有了本錢(qián)”。阿膠能補(bǔ)血滋陰、潤(rùn)燥止血，自古為滋補(bǔ)上品。

　　阿膠系驢皮經(jīng)煎煮濃縮成的固體膠。近年來(lái)，隨著驢皮貨源緊缺，市面上存在不法商販弄虛作假，以次充好，以牛皮、馬皮等下腳料冒充驢皮制作假冒偽劣阿膠的行徑，嚴(yán)重?cái)_亂了阿膠市場(chǎng)。其他獸畜皮熬膠，也有補(bǔ)血止血的功能，但阿膠偽品的蛋白質(zhì)成分及其含量和阿膠真品存在明顯不同，與驢皮膠使用效果相差甚遠(yuǎn)。因此，掌握阿膠的真?zhèn)舞b別方法至關(guān)重要。

　　為了進(jìn)一步規(guī)范阿膠產(chǎn)業(yè)發(fā)展，提升阿膠品質(zhì)保障能力，國(guó)家藥典委在2019年發(fā)布關(guān)于“關(guān)于阿膠、海龍、海馬等國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)修訂草案的公示”和“關(guān)于阿膠國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)修訂草案的公示(第二次)”兩項(xiàng)公示稿，分別對(duì)阿膠【含量測(cè)定】和阿膠【鑒別】項(xiàng)下內(nèi)容進(jìn)行了修訂。其中阿膠【含量測(cè)定】項(xiàng)修訂幅度大，新增了“特征多肽”含量要求：

　　驢源多肽A1特征離子對(duì)：m/z469.25>712.30和m/z z469.25>783.40，

　　驢源多肽A2特征離子對(duì)：m/z618.35> 779.40和m/z618.35> 850.40，

　　按干燥品計(jì)算，“含特征多肽以驢源多肽A1(C41H68N12O13)和驢源多肽A2(C51H82N18O18)的總量計(jì)應(yīng)不得少于0.17%”。

　　此外，在2012年藥典委頒布了《阿膠中牛皮源質(zhì)量的補(bǔ)充檢驗(yàn)方法》。2015版《中國(guó)藥典》中，明確規(guī)定使用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法用于阿膠、龜甲膠、鹿角膠的鑒別。近，國(guó)家藥監(jiān)局還頒布了《阿膠中豬皮源的補(bǔ)充檢驗(yàn)方法》，在阿膠產(chǎn)品中應(yīng)不得檢出豬皮源(新阿膠)成分。

　　島津參考以上標(biāo)準(zhǔn)和文獻(xiàn)報(bào)道，使用胰蛋白酶對(duì)阿膠、牛皮膠和豬皮膠等不同來(lái)源的明膠類物質(zhì)進(jìn)行酶切處理，通過(guò)島津LCMS-8045液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(圖1)對(duì)特征多肽進(jìn)行測(cè)定，從而實(shí)現(xiàn)阿膠與雜皮膠的鑒別與阿膠的定量。

圖 1 島津 LCMS-8045液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀

　　主要方法參數(shù)

　　色譜柱：

　　Shim-pack GIST (2.1 mm I.D.×100 mm L., 2.0 μm)

　　MRM參數(shù)：見(jiàn)表1

　　表1 MRM優(yōu)化參數(shù)

對(duì)照藥材分析

　　采用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用的方法，一次進(jìn)樣，同時(shí)分析8種特征多肽，實(shí)現(xiàn)阿膠藥材的鑒別與定量。分析結(jié)果表明，阿膠、驢源多肽A1、驢源多肽A2、黃明膠、鹿角膠、龜甲膠、新阿膠、馬皮源多肽信噪比均大于10：1，完全滿足檢測(cè)要求。如下圖2(左右滑動(dòng)查看全部?jī)?nèi)容)

圖2 阿膠等8種特征肽定性色譜圖

　　樣品測(cè)定

　　對(duì)阿膠樣品進(jìn)行測(cè)定，黃明膠、鹿角膠、龜甲膠、新阿膠、馬皮源通道均未檢出；阿膠、驢源多肽A1、驢源多肽A2分離良好，峰形對(duì)稱，且信噪比均大于10：1。如下圖3(左右滑動(dòng)查看全部?jī)?nèi)容)

圖3 阿膠定性定量肽段測(cè)量

　　總結(jié)

　　阿膠作為滋補(bǔ)佳品，消費(fèi)者平時(shí)關(guān)注更多的是阿膠的功效。其實(shí)，無(wú)數(shù)“實(shí)驗(yàn)猿”為了保證阿膠的真實(shí)與有效，默默地完成了大量阿膠藥材真?zhèn)舞b別與含量測(cè)定的工作。有了本文的方法，“實(shí)驗(yàn)猿”可以一針進(jìn)樣鑒別多種肽段，節(jié)省時(shí)間。除此之外，本方法加入了定量肽段，可以實(shí)現(xiàn)定性定量同時(shí)分析。

　　“暗服阿膠不肯道，卻說(shuō)生來(lái)為君容”。更多關(guān)于阿膠的文章，參閱島津推出《膠類藥材定性鑒別解決方案》。

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