HiCynth™月桂基硫酸鹽肉湯（微生物培養(yǎng)基）
HiCynth™月桂基硫酸鹽肉湯，又稱為HiCynth™月桂基胰蛋白?肉湯，用于檢測水、廢水、奶制品及其他食品樣品中的大腸菌群的檢測。
HiCynth™月桂基硫酸鹽肉湯（微生物培養(yǎng)基）
組成：
成分 g/L
HiCynth™蛋白胨4號(hào) 20.000
乳糖 5.000
氯化鈉 5.000
* 2.750
磷酸二氫鉀 2.750
月桂基硫酸鈉 0.100
zui終pH值（25℃） 6.8±0.2
HiCynth™月桂基硫酸鹽肉湯（微生物培養(yǎng)基）
使用指導(dǎo)：
在1000ml蒸餾水中重懸35.6 g培養(yǎng)基干粉。必要時(shí)加熱以*溶解。轉(zhuǎn)入包含有倒置Durhams管的試管中。高壓滅菌（15磅121℃，15分鐘）。接種液在1ml以下，則正常使用；接種液在10ml以上，則使用雙倍量的培養(yǎng)基。
原理和說明：
大腸菌群被認(rèn)為是腸桿菌科的成員。腸桿菌科在膽汁鹽存在下生長并在37℃48小時(shí)培養(yǎng)后可發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣1。這些細(xì)菌通常具有β-半乳糖苷酶2。月桂基硫酸鈉肉湯用于檢測水、乳制品和其他食品中的大腸菌群，正如美國公共衛(wèi)生學(xué)會(huì)*的3,4,5。它也可以用于通過MPN試驗(yàn)檢測水或污水中的大腸菌群3。月桂基硫酸鹽肉湯是由Mallmann和Darby開發(fā)的6。Cowls7證實(shí)加入十二烷基硫酸鈉使得培養(yǎng)基對大腸菌群具有選擇性。后來研究發(fā)現(xiàn)，月桂基硫酸鈉肉湯比標(biāo)準(zhǔn)方法培養(yǎng)基提供更高的克隆指數(shù)。月桂基硫酸鹽肉湯提供的產(chǎn)氣在水的常規(guī)檢測中，不僅作為一種大腸菌群的假設(shè)檢驗(yàn)，而且還作為確認(rèn)試驗(yàn)6。月桂基硫酸鹽肉湯也是由ISO委員會(huì)*用于檢測大腸桿菌8。月桂基硫酸鹽HiCynth™肉湯是由用化學(xué)限定的蛋白胨*替代基于動(dòng)物或植物的蛋白胨，以避免與動(dòng)物蛋白胨有關(guān)的海綿狀腦病風(fēng)險(xiǎn)。
月桂基硫酸鹽HiCynth™肉湯旨在從小量大腸菌群接種量中獲得豐饒生長和大量氣體。有氧孢子攜帶者在這種培養(yǎng)基中被*抑制。HiCynth™蛋白胨No.4提供必需的生長物質(zhì)，如氮和碳化合物，長鏈氨基酸，維生素，硫酸鹽和微量成分。磷酸鉀提供緩沖系統(tǒng)，而氯化鈉保持滲透平衡。月桂基硫酸鈉抑制大腸菌群以外的生物體。對于1ml或更少的接種量，使用單一強(qiáng)度培養(yǎng)基。對于10ml或更多的接種量，使用雙重強(qiáng)度或比例培養(yǎng)基。接種后，管在37℃下孵育24至48小時(shí)。對于顯示發(fā)酵（初級(jí)發(fā)酵）的每個(gè)管，再從初級(jí)發(fā)酵管中取樣接種兩管月桂基硫酸鹽HiCynth™肉湯，并在37℃和44℃孵育分別孵育。如果在44℃下8?24小時(shí)后，在培養(yǎng)管中存在發(fā)酵，可加入Kovacs試劑進(jìn)行吲哚試驗(yàn)。陽性吲哚試驗(yàn)表明氣體產(chǎn)生，即存在大腸菌群。如果37℃孵育24小時(shí)后沒有發(fā)酵，初次發(fā)酵則是其他生物體引起，而非大腸菌群。肉湯儲(chǔ)存于2-8℃時(shí)，開始會(huì)渾濁，但在室溫下會(huì)清澈。標(biāo)準(zhǔn)流程參考相關(guān)文獻(xiàn)3,4,5。
質(zhì)量控制
外觀
乳白色至黃色均一松散粉末
制備的培養(yǎng)基顏色和透明度
黃色透明溶液，無沉淀
pH值（25℃）
6.60-7.00
培養(yǎng)反應(yīng)
35℃-37℃培養(yǎng)18-24小時(shí)。
微生物 | 接種量（CFU） | 生長狀況 | 產(chǎn)氣 | 吲哚產(chǎn)生 （44°C） |
大腸桿菌ATCC 25922 | 50-100 | 生長旺盛 | 陽性 | 陽性反應(yīng)，培養(yǎng)基交界處有紅色環(huán)狀物 |
產(chǎn)氣腸桿菌ATCC 13048 | 50-100 | 生長旺盛 | 陽性 | 陰性反應(yīng)，無顏色產(chǎn)生/環(huán)模糊 |
糞腸球菌ATCC 29212 | >=10³ | 生長旺盛 | 陰性 | 陰性反應(yīng)，無顏色產(chǎn)生/環(huán)模糊 |
鼠傷寒沙門氏桿菌 ATCC 14028 | 50-100 | 生長旺盛 |
金黃葡萄球菌ATCC 25923 | >=10³ | 生長旺盛 |
儲(chǔ)存和保質(zhì)期
30℃以下密閉保存。配好后的培養(yǎng)基2-8℃保存。在標(biāo)簽上的截止日期前使用。
參考文獻(xiàn)：
1. Department of Environment, Department of Health and Social Security, Public Health Laboratory Service, 1982, Methods for the Examination of Water and Associated Materials, The Bacteriological Examination of Drinking Water Supplies, 1982, Her Majestys Stationary Office, London.
2. Collee J. G., Fraser A. G., Marmion B. P., Simmons A., (Eds.), Mackie and McCartney, Practical Medical Microbiology, 1996, 14th Edition, Churchill, Livingstone
3. Eaton A. D., Clesceri L. S., Rice E. W. and Greenberg A. W., (Eds.), 2012, Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 22nd Ed., APHA, Washington, D.C.
4. Marshall R. T., (Ed.), 1992, Standard Methods for the Examination of Dairy Products, APHA, Washington, D.C.
5. Downes F. P. and Ito K., (Eds.), 2001, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 4th Ed., APHA, Washington, D.C.
6. Mallmann W. C. and Darby C. W., 1941, Am. J. Public Health, 31:127
7. Cowls P. B., 1938, J. Am. Water Works Assoc., 30:979.
8. International Organization for Standardization (ISO), 1991, Draft ISO/DIS 4831.
